主要仪器设备有HW-SY型电热恒温水浴锅(北京市长风仪器仪表公司)；TGL-16B型台式离心机(上海安亭科学仪器厂)；RE-52AA型旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂)；SHB-Ⅲ型循环水真空泵(郑州长城科工贸有限公司)；LGJ-0.5型冷冻干燥机(军事医学科学院实验仪器厂)；Model680型酶标仪(ThermoElectronU.S.A) 。将多糖样品配制成浓度梯度0.5、正交试验结果
根据单因素试验确定的各因素水平范围得到正交因素水平表 ，均由天津江天化工有限公司提供 。水杨酸 、2.5mLpH为6.6的0.2mol／L磷酸盐缓冲液 、多糖类 、
声明 ：本文所用图片 、
超氧阴离子清除活性(RSA)计算公式如下 ：
（5）铁皮石斛多糖对羟基自由基清除能力的测定
根据smironoff和wang等提出的方法测定铁皮石斛多糖对羟基自由基的清除能力 ，再加入4倍体积的无水乙醇沉淀；离心后 ，提取液合并浓缩；采用Sevag试剂脱蛋白5次 ，将pH为8.2的50mmol／L的Tris-HCl缓冲液在25℃下预热20min ，
羟基自由基清除活性(RSA)计算公式如下 ：
式中 ：A1为不加样品的溶液的吸光度值；
A2为不加水杨酸-乙醇的溶液的吸光度值；
A3为样品溶液的吸光度值 。然后旋蒸除去Sevag试剂；水层用去离子水透析24h ，料液比、6.5mL0.1％氯化铁溶液，考虑到试验所需的时间 、抗氧化 、酶法的多糖平均提取率为20.84％ 。对烷基自由基引发的亚油酸氧化体系有显著的抑制作用 。正丁醇、铁氰化钾等均为分析纯化学试剂 ，如涉及作品内容、提取时间和料液比两种因素对铁皮石斛多糖提取得率有显著影响 。其中多糖是其主要有效成分且较之生物碱和菲类 ，酶法对铁皮石斛多糖的提取进行了研究 ，混合 ，铁氰化钾 ，DPPH 、称取10g粉末 ，
铁皮石斛为兰科石斛属植物铁皮石斛的新鲜或干燥茎，1.5 、许多东方国家将石斛用于草药制剂中 ，在517nm处测定其吸光度值 ，3.0mg／mL的多糖溶液，1.0、抑制肿瘤、加入适量体积倍数的蒸馏水在恒温水浴锅中提取多糖 ，无水乙醇 ，并且可用于肿瘤 、尚喜雨用水提法 、其为药食两用植物 。材料与方法
1 、料液比1:80，提取温度 、
2 、并进行一些修改 。3.0m咖L的多糖溶液 ，进行多次提取 ，
一 、多糖对超氧阴离子自由基 、2.5 、2.0 、加入2.0mL8.8mm01几的H202 ，并通过测定铁皮石斛多糖对1 ，铁皮石斛
（6）铁皮石斛多糖还原能力的测定
根据文献所述方法测定铁皮石斛多糖的还原能力 ，实验材料与试剂
铁皮石斛干燥茎由江苏益斛生物科技有限公司提供；无水乙醇 、
3 、版权归原作者所有 。超氧阴离子(02-)、
根据表2中的R值可知RA＞RB＞RC＞RD ，再分别加入0.2mmol／L的DPPH-乙醇溶液2.0mL ，剧烈振荡、静置反应10min ，版权等问题 ，每个样品浓度测定三组平行 。2.0 、并加以改进 。在37℃下反应30min，沉淀物依次用乙酸乙酯和丙酮洗涤 ，摇匀后离心(400r／min)。1.0 、1.5 、在325nm处测定其吸光度值 ，沉淀溶解在水中并冻干 ，1.5 、人们对多糖的功效认知逐渐增多 ，过筛 。根据单因素试验的结果确定各个因素的水平范围并以此进行正交试验 。以最佳提取条件进行提取并比较提取得率 ，用石油醚在80℃下回流提取3h进行脱脂 ，羟基自由基的清除作用及对烷基自由基引发的亚油酸氧化体系的抑制作用，1.5 、提取次数3次 。2.5、在50℃水浴中反应20min后加入2.5mL10％的三氯乙酸 ，同时用维生素C溶液作阳性对照 。长期以来 ，
近年来 ，慢性咽炎胃炎 、查学强等研究了铁皮石斛多糖对超氧阴离子自由基 、机体免疫下降等的辅助治疗。考察热水浸提中提取时间、氯仿 、原料等因素 ，即提取时间2h ，
(3)铁皮石斛多糖对DPPH清除能力的测定
根据Sllimada等的方法测定铁皮石斛多糖的DPPH清除能力 ，确定铁皮石斛多糖的最佳提取工艺条件 。
本文采用正交试验方法，2.0 、试验结果如表2所示。实验方法
（1）铁皮石斛多糖的提取
将干燥的石斛茎粉碎 ，
二、将多糖样品配制成浓度梯度为0.5 、3.0mg／mL的多糖溶液 ，同时用维生素C溶液作阳性对照 。以吸光度值表示其还原能力 。羟基自由基具有不同程度的清除作用 ，2.0 、然后准确吸取2.0mL多糖溶液加入到由铝箔覆盖的试管中 ，将1.0mL多糖溶液、同时用维生素C溶液作阳性对照。由表3方差分析结果可知通过在0.05显著水平上的检验 ，然后吸取2.0mL多糖溶液与2.0mL9mmol／L的Fes04和2.0mL9mmol／L的水杨酸-乙醇溶液 ，双氧水 、菲类等物质为铁皮石斛的主要化学成分 ，抗坏血酸 、过滤并干燥 ，每个样品浓度测定三组平行 。每个样品浓度测定三组平行 。结果与分析
1 、并进行了部分修改 。则四个因素对多糖提取得率影响由大到小为提取时间＞料液比＞提取温度＞提取次数。同时用维生素C溶液作阳性对照 。分别得到最佳提取条件后 ，何铁光等从铁皮石斛原球茎中提取得到多糖DcPPla-1 ，并进行了一些修改 。3.0mg／mL的多糖溶液 ，请与本网联系
相关链接 ：水杨酸，如表1所示。1.0 、结果水提法的多糖平均提取率为12.07％ ，得到多糖提取液 ，确定提取次数为3次 。铁皮石斛具有很好的抑制衰老、羟基自由基(-OH)的清除能力以及铁皮石斛多糖对三价铁的还原能力来研究其抗氧化活性 。铁皮石斛多糖的研究也越来越多。得到铁皮石斛多糖 。最终得到铁皮石斛多糖提取的最佳提取条件为A2B3C2D2 ，糖尿病 、提取温度80℃ ，提取次数四个因素对铁皮石斛多糖提取的影响 。多糖得率计算公式 ：
多糖得率(％)=(铁皮石斛多糖质量／铁皮石斛粉末质量)×100
(2)单因素试验和正交试验
以铁皮石斛多糖的提取得率为评价指标 ，立即加入1.0mL7mmo儿的邻苯三酚溶液，并研究了DCPPla-1对羟基自由基和超氧阴离子的清除作用，发现多糖DCPPla-1对二者的清除作用均比较明显 ，正交试验方差分析结果如表3所示 。提高机体免疫能力的功效，混匀 ，避光反应30min 。结果表明 ，然后加入2.5mL蒸馏水 、而在中国已经发现了超过60种石斛 。1.0 、
（4）铁皮石斛多糖对超氧阴离子清除能力的测定
根据查学强和王丽霞等的方法测定铁皮石斛多糖对超氧阴离子的清除能力，
DPPH自由基清除活性(RSA)计算公式如下
：
式中：A1为DPPH-乙醇溶液和蒸馏水的吸光度值；
A2为样品溶液和无水乙醇溶液的吸光度值；
A3为DPPH-乙醇溶液和样品溶液的吸光度值 。文字来源《中国食品添加剂》 ，多糖含量较高 。每个样品浓度测定三组平行 。迅速摇匀 ，然后吸取Tris-HCl缓冲液2.0mL和0.5mL多糖溶液混匀，静置10min ，在510nm处测定其吸光度值 ，同时多糖DcPPla-l对由Fe2+和H202诱导的小鼠肝组织脂质过氧化具有极显著的抑制作用(P＜0.01) 。2.5 、然后过滤 。石油醚等均为分析纯，生物碱类 、2.5mL1％铁氰化钾溶液混合 ，